離心機在生物科學上的應(yīng)用
點擊次數(shù):3725 更新時間:2014-11-22
離心機在生物科學上的應(yīng)用已經(jīng)不在是大驚小怪的事了,離心技術(shù)在生物科學,特別是在生物化學和分子生物學研究領(lǐng)域,早已起到重要的作用,每個生物化學和分子生物學實驗室以及各類高校都要安裝多種型式的高速離心機。離心技術(shù)主要用于各種生物樣品的分離和制備,生物樣品懸浮液在高速旋轉(zhuǎn)下,由于巨大的離心力作用,使懸浮的微小顆粒(細胞器、生物大分子的沉淀等)以一定的速度沉降,從而與溶液得以分離,而沉降速度取決于顆粒的質(zhì)量、大小和密度。
一般情況下,低速離心時常以轉(zhuǎn)速“rpm”來表示,高速離心時則以“g”表示。計算顆粒的相對離心力時,應(yīng)注意離心管與旋轉(zhuǎn)軸中心的距離“r”不同,即沉降顆粒在離心管中所處位置不同,則所受離心力也不同。因此在報告超離心條件時,通??偸怯玫匦囊Φ谋稊?shù)“×g”代替每分鐘轉(zhuǎn)數(shù)“rpm”,因為它可以真實地反映顆粒在離心管內(nèi)不同位置的離心力及其動態(tài)變化??萍嘉墨I中離心力的數(shù)據(jù)通常是指其平均值(RCFav),即離心管中點的離心力。
為便于進行轉(zhuǎn)速和相對離心力之間的換算,Dole和Cotzias利用RCF的計算公式,制作了轉(zhuǎn)速“rpm”、相對離心力“RCF”和旋轉(zhuǎn)半徑“r”三者關(guān)系的列線圖,圖式法比公式計算法方便(列線圖參見附錄)。換算時,先在r標尺上取已知的半徑和在rpm標尺上取已知的離心機轉(zhuǎn)數(shù),然后將這兩點間劃一條直線,與圖中RCF標尺上的交叉點即為相應(yīng)的相對離心力數(shù)值。注意,若已知的轉(zhuǎn)數(shù)值處于rpm標尺的右邊,則應(yīng)讀取RCF標尺右邊的數(shù)值,轉(zhuǎn)數(shù)值處于rpm標尺左邊,則應(yīng)讀取RCF標尺左邊的數(shù)值。
一般情況下,低速離心時常以轉(zhuǎn)速“rpm”來表示,高速離心時則以“g”表示。計算顆粒的相對離心力時,應(yīng)注意離心管與旋轉(zhuǎn)軸中心的距離“r”不同,即沉降顆粒在離心管中所處位置不同,則所受離心力也不同。因此在報告超離心條件時,通??偸怯玫匦囊Φ谋稊?shù)“×g”代替每分鐘轉(zhuǎn)數(shù)“rpm”,因為它可以真實地反映顆粒在離心管內(nèi)不同位置的離心力及其動態(tài)變化??萍嘉墨I中離心力的數(shù)據(jù)通常是指其平均值(RCFav),即離心管中點的離心力。
為便于進行轉(zhuǎn)速和相對離心力之間的換算,Dole和Cotzias利用RCF的計算公式,制作了轉(zhuǎn)速“rpm”、相對離心力“RCF”和旋轉(zhuǎn)半徑“r”三者關(guān)系的列線圖,圖式法比公式計算法方便(列線圖參見附錄)。換算時,先在r標尺上取已知的半徑和在rpm標尺上取已知的離心機轉(zhuǎn)數(shù),然后將這兩點間劃一條直線,與圖中RCF標尺上的交叉點即為相應(yīng)的相對離心力數(shù)值。注意,若已知的轉(zhuǎn)數(shù)值處于rpm標尺的右邊,則應(yīng)讀取RCF標尺右邊的數(shù)值,轉(zhuǎn)數(shù)值處于rpm標尺左邊,則應(yīng)讀取RCF標尺左邊的數(shù)值。
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